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Curso de PCR intensivo

  • Nivel del curso: Intermedio

Acerca de este curso

Vamos a explicar en profundidad los fundamentos de la amplificación por reacción en cadena de la polimerasa (PCR).

Descripción

El curso dura 8 semanas, el contenido está disponible on-demand.
Se puede pedir el temario en PDF  a cursos@biocealab.com

Este curso está separado en dos partes fundamentales: PCR convencional y PCR Real Time.

Vamos a explicar en profundidad los fundamentos de la reacción en cadena cadena de la polimerasa PCR.

Se van a ver los métodos de extracción de ácidos nucleicos tanto manual como automatizada.

Vamos a describir las diferentes enzimas utilizadas para amplificar ADN, sus fuentes de orígen y la evolución de las nuevas generaciones de enzimas.

Vamos a aprender a como diseñar primers de manera manual y por medio de herramientas bioinformáticas.

Se van a hablar de los métodos de detección de una PCR convencional usados principalmente en los laboratorios de investigación, como son la electroforesis y la secuenciación.

Se verán los fundamentos y aplicaciones de la PCR cuantitativa o Q-PCR.

Veremos otras variantes como PCR digital o droplet PCR.

También el curso incluye un módulo sobre la detección del SARS-COV-2.

 

Cada módulo tiene un cuestionario que se deberá contestar para recibir el certificado de aprobación al finalizar el  curso.


Se encuentra prohibida  la reproducción total y parcial y/o utilización sin previa autorización. Ley 11723.

MÓDULO 1

Lección 1: PCR convencional. Fundamentos de la de la reacción en cadena de la polimerasa. Función de las polimerasas de ADN, termoestabilidad de las polimerasas de ADN. Primers, estructura y función de los primers. Nucleótidos, tipos de nucleótidos. Estructura del ADN, enlaces de la doble hebra. Importancia y función del termociclador. Ciclado, importancia de la temperatura.

Lección 2: Técnica de la PCR. Como realizar la técnica de PCR en un laboratorio. Equipamiento necesario. Reactivos. Como se obtienen los reactivos. Como preparar y almacenar los reactivos. Como calcular las concentraciones de los reactivos para una PCR. Como preparar una Master MIX paso a paso. Termociclador, características generales. Como setear un termociclador. Condiciones de ciclado estándares.

Lección 3: ADN y ARN estructura química, característica, función. Diferencias. Genomas de ADN y ARN. Como usar el ADN y ARN como moldes.

Lección 4: Extracción de ácidos nucleicos. Fundamentos de la extracción. Etapas. Consideraciones generales. Reactivos necesarios para la extracción, función de cada uno. Preparación de las soluciones tamponadas. Extracción manual. Extracción con Kits. Extracción automatizada. Ventajas y desventajas. Protocolos para la extracción de diversas muestras, consideraciones en cada caso.

MÓDULO 2

Lección 1: Polimerasas generalidades. Clasificación de las polimerasas de acuerdo al molde que utilizan ADN o ARN. Dominio catalítico. Corrección de errores, actividad 3’ exonucleasa y mutaciones. Conceptos de fidelidad, procesividad y progresividad. ADN polimerasas eucariotas y procariotas.

Lección 2: Transcriptasas reversas. Flujo de la información genética. Genomas virales y descubrimiento de las retrotranscriptasas. Ejemplos de transcriptasas reversas. Complementariedad de bases. Síntesis de ADNc.

Lección 3: Historia y evolución de las polimerasas. Microorganismos termofílicos y sus polimerasas. Taq, Pfu, Vent, KOD, características generales. Polimerasas de nuevas generaciones. Polimerasas recombinantes. Evolución dirigida e ingeniería de proteínas.  Polimerasas comerciales, mejoras incluidas en cada nueva generación.

MÓDULO 3

Lección 1: Primers caracteristicas. Secuencia,  composición, longitud, inicio, terminación. Contenido de G/C y su importancia, como calcular el porcentaje de GC. Temperatura de melting y temperatura de hibridación, como calcular.

Lección 2: Diseño de primers. Formato de secuencias. Bases de datos de secuencias. Consideraciones para el diseño a mano, ejemplos. Primers específicos. Primers degenerados.

Lección 3: Herramientas bioinformáticas para el diseño de primers. Primer3, BLAST-primer, CODEHOP. Características y usos de cada una de las herramientas.

MÓDULO 4:

Lección 1: Métodos de detección de la PCR convencional. Espectrofotometría, cuantificacion de acidos nucleicos y determinación de pureza. Fundamentos de la electroforesis. Soporte para la electroforesis: geles, acetato de celulosa o liquida. Equipos para electroforesis. Importancia del potencial eléctrico, voltajes. Importancia del buffer de corrida. Ejemplos de electroforesis de acuerdo al soporte.

Lección 2: Electroforesis en geles de agarosa. Importancia de la concentración del gel. Poder resolutivo. Preparación de la muestra. Buffer de carga, composición. Buffer de corrida composición. Como setear la corrida el equipo. Amperaje, voltaje. Revelado, colorantes más utilizados GEL-RED, Bromuro de etidio. Como interpretar una corrida de producto de PCR.

Lección 3:Electroforesis en geles de poliacrilamida PAGE. Acrilamida bisacrilamida, características. Catalizadores, APS, TEMED. PAGE no desnaturalizante para ADNds. Diferencias entre geles para proteínas y para ADN. Importancia de la concentración. Valores T y C. Buffer de corrida. Buffer de carga.   Revelado por tinción con Nitrato de plata, bromuro de etidio, sensibilidad. Análisis. Ventajas y desventajas del uso de poliacrilamida.

Lección 4: Secuenciación y análisis bioinformático.  Técnica de secuenciación por SANGER generalidades. Preparación de la muestras para secuenciación, preparación de los primers. Consideraciones. Análisis de las secuencias, programas de edición y análisis, bioedit, blast. Como interpretar un cromatograma.

Temas de este curso

32 Lecciones40h

INFORMACIÓN PARA NUESTROS ALUMNOS

Área de consultas

MÓDULO 1: PCR convencional fundamentos?

Describe el como la ADN polimerasa termoestable puede amplificar ADN in vitro. Describe como se realiza la técnica de PCR en un laboratorio. Estructura y función de los ácidos nucleicos, ADN y ARN. Fundamentos de la extracción de ADN y ARN. Protocolos.

MÓDULO 2: Enzimas polimerasas

MÓDULO 3: Primers, cebadores o iniciadores

MÓDULO 4: Sistemas de detección y análisis de la PCR?

En este módulo se aprenderá a analizar una PCR convencional por medio de corridas electroforéticas. Y también por secuenciación y análisis bioinformático.

MÓDULO 5: Variantes de la PCR

MÓDULO 6: PCR en tiempo real

MÓDULO 7: Cuantificación

MÓDULO 8: PCR para el SARS-COV-2

Sobre los instructores

Formación académica:
  • Doctorando en Salud Pública Mención epidemiología
  • Biotecnóloga - Bióloga Molecular
  • Técnica Química Universitaria
  • Técnica en laboratorio
Carrera laboral:
  1. Co-Directora Técnica en Empresa de reactivos para uso in vitro - Internacional
  2. Profesora en Fundación Química Argentina
Antes:
  • Asesora Científica para Roche Diagnostics
  • Proyecto de Investigación en Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular - Universidad de Buenos Aires
  • Trabajó en Instituto Argentino de Diagnóstico y Tratamiento - Buenos Aires
  • Trabajó en Hospital Teodoro Álvarez - Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires
Otras formaciones:
  • Coaching y liderazgo profesional
  • PNL
  • Auditora de calidad
  • Especialista en Nutrición funcional
 
4.60 (5 valoraciones)

8 Cursos

139 estudiantes

Formación académica: Licenciada en Génetica por la Universidad Nacional de Misiones Doctorando en Ciencias Aplicadas por la Universidad Nacional de Misiones Especialista en biología y biotecnología de hongos Carrera Profesional: Supervisora de laboratorio de bioinsumos y microbiología en BIO.MI.SA. Profesora en Fundación Química Argentina Profesora en Escuela Superior de Biotecnología Agrícola y Ambiental Antecedentes profesionales: Dirección de Tesis de grado Ayudante diplomado, UNAM Instituto de Biotecnología Misiones ¨María Ebe Reca¨ tesis de doctorado Laboratorio de Biotecnología molecular, auxiliar de laboratorio  
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2 Cursos

39 estudiantes

Comentarios de estudiantes

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Es la primera vez que ingreso a una plataforma de estudio acerca de la Biologia molecular y me gusto mucho, todos los modulos muy explicados y sin
redundaciones, como me estoy iniciando en esta área, me servira de mucho todo lo aprendido. Gracias.

Muy claros los temas, las profesoras explican todo muy claro

Me gusto el aprendizaje de todo el curso

Me resultó útil. Gracias.

USD$100.00

Materiales incluidos

  • Videoclases explicativas.
  • Material bibliográfico en PDF descargable.
  • Presentaciones descargables.
  • Consultas con las profesoras.
  • Devoluciones personalizadas.
  • Reuniones virtuales con las profesoras.
  • Certificado de aprobación del curso.

Requisitos

  • Tener conocimientos básicos de biología molecular
  • Se rinde un trabajo práctico o cuestionario para obtener el certificado de aprobación final del curso.

Audiencia objetivo

  • Graduados universitarios o estudiantes avanzados en el área de Biología
  • Biotecnología
  • Genética
  • Bioquímica y carreras afines
  • Técnicos de laboratorio
  • Estudiantes
  • Licenciados y Graduados de carreras biosanitarias y experimentales.
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