Curso de Experto en Western Blot

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Acerca de este curso

ACCESO INMEDIATO – CURSO ON DEMAND
Puedes pedir el temario en PDF a cursos@biocealab.com

El curso de Western blot abarca diferentes aspectos de esta técnica (históricos, generales, el paso a paso, y el “troubleshooting”), de una manera íntegra, concisa, accesible y cubre ampliamente los puntos de dudas y consultas generales que puedan surgir.

Está destinado a todo aquel individuo profesional o en formación que desee introducirse de lleno en esta técnica, actualizar sus conocimientos, o simplemente aprender un método sumamente valioso y cuya aplicación se da en la gran parte de los laboratorios de biología molecular que trabajen con proteínas.

El alumno entonces obtendrá una base profunda y fundamentada que le permitirá encarar de manera razonable experimentos que requieran de esta técnica, poniendo en práctica los conceptos, consejos y recomendaciones adquiridos durante el desarrollo del curso.

Se encuentra prohibida  la reproducción total y parcial y/o utilización sin previa autorización. Ley 11723.


PROGRAMA 

MÓDULO 1: GENERALIDADES DEL WESTERN BLOT

  • Historia y teoría del Western Blot
  • Aplicaciones del Western Blot
  • Etapas del Western Blot
  • Ventajas y desventajas de la técnica

MÓDULO 2: PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS

  • Extracción de proteínas de una muestra
  • Determinación de la concentración de proteínas
  • Preparación de las muestras para cargar un gel

MÓDULO 3: ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA

  • El gel de poliacrilamida
  • Química de los sistemas de electroforesis
  • La electroforesis
  • Otros elementos a considerar a la hora de sembrar un gel
  • Visualización de las proteínas en el gel

MÓDULO 4: TRANSFERENCIA DE PROTEÍNAS DE UN GEL A UNA MEMBRANA

  • Generalidades de la transferencia
  • Sistemas de electrotransferencia
  • Membranas de transferencia
  • Buffers de transferencia
  • Chequeo de la transferencia

MÓDULO 5: BLOQUEO DE LA MEMBRANA

  • Generalidades y fundamentos del bloqueo
  • Reactivos y soluciones para el bloqueo

MÓDULO 6: INCUBACIÓN CON UN ANTICUERPO PRIMARIO

  • Teoría de la interacción antígeno-anticuerpo
  • Anticuerpos primarios monoclonales y policlonales
  • Procedimiento general para la incubación con anticuerpo primario
  • Consideraciones para la elección de un anticuerpo primario

MÓDULO 7: INCUBACIÓN CON UN ANTICUERPO SECUNDARIO

  • Tipos de anticuerpos secundarios y moléculas asociadas
  • Procedimiento general para la incubación con anticuerpo secundario
  • Consideraciones para la elección de un anticuerpo secundario

MÓDULO 8: SISTEMAS Y MÉTODOS DE DETECCIÓN DE LA SEÑAL

  • Métodos de revelado y desarrollo de la señal
  • Sistemas de detección de la señal

MÓDULO 9: PROBLEMAS FRECUENTES Y SOLUCIONES


MÓDULO 10: APLICACIONES EN INDUSTRIA FARMACÉUTICA, ALIMANTARIA Y DIAGNÓSTICA


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¿Qué aprenderás?

  • Comprender de una manera centralizada y concentrada, los fundamentos teóricos y prácticos de la técnica.
  • Satisfacer las dudas y resolver problemáticas que se plantean en el trabajo cotidiano.
  • Obtener un panorama general de la técnica de manera íntegra, concisa y accesible.
  • Manejar los diferentes aspectos que permitieron el desarrollo de esta técnica (históricos, generales, el paso a paso, variantes, y el "troubleshooting").
  • Criterio para adaptar la técnica en función de las necesidades experimentales.

Contenido del curso

BIENVENIDOS

  • Información para alumnos

MÓDULO 1 – GENERALIDADES DEL WESTERN BLOT
En este módulo se recorrerá la historia de esta técnica, así como las etapas generales y aplicación de este método.

MÓDULO 2 – PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS

MÓDULO 3 – ELECTROFORESIS EN GELES DE POLIACRILAMIDA

MÓDULO 4 – TRANSFERENCIA DE PROTEÍNAS DE UN GEL A UNA MEMBRANA
En este módulo se tratarán los sistemas de transferencia, los tipos de membranas que se emplean, los buffers utilizados y cómo es la verificación del proceso de electrotransferencia.

MÓDULO 5 – BLOQUEO DE LA MEMBRANA
En este módulo se analizarán generalidades, fundamentos, reactivos y soluciones para el bloqueo de una membrana.

MÓDULO 6 – INCUBACIÓN CON UN ANTICUERPO PRIMARIO
En este módulo, se mostrarán todos los aspectos teóricos de la interacción antígeno-anticuerpo, los criterios y consideraciones que se deben tener para elegir un anticuerpo primario, los tipos de anticuerpos primarios que existen y otros factores.

MÓDULO 7 – INCUBACIÓN CON UN ANTICUERPO SECUNDARIO
Este módulo abarcará los tipos de anticuerpos secundarios, sus etiquetas y consideraciones necesarias a la hora de elegir uno.

MÓDULO 8 – SISTEMAS Y MÉTODOS DE DETECCIÓN DE LA SEÑAL
Este módulo abarca los diferentes métodos existentes para desarrollar la señal de un western blot y permitir su detección, así como los dispositivos y sistemas para ello.

MÓDULO 9 – PROBLEMAS FRECUENTES Y SOLUCIONES
En este módulo se describirán algunos de los problemas cotidianos que ocurren durante el Western blot, sus causas y posibles soluciones.

MÓDULO 10 – APLICACIONES
En este módulo se verán aplicaciones en la industria farmacéutica, alimentaria y diagnóstica.

TRABAJO FINAL

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